無縫克隆和組裝技術是一種新的、快速、簡潔的克隆方法，旨在克服上述缺陷，它可以在質粒的任何位點進行一個或多個目標DNA的片斷的插入，而不需要任何限制性內切酶和連接酶。突破傳統的雙酶切再加上連接，只需要一步重組法，即可得到高效率克隆的重組載體。
1、位點選擇靈活：載體任意位置基因克??；
2、快速簡便：省略酶切、割膠回收、酶連等過程，大約1h完成載體構建；
3、精確：不需要增加任何額外的程序；
4、克隆效率高，陽性克隆高達90%以上；
5、一次進行多片段目的基因的重組。