蛋白酶K(Proteinase K)，來(lái)源于林伯氏白色念球菌 Tritirachium album Limber）的蛋白酶K基因，屬于絲氨酸蛋白酶類。蛋白酶K具有極高的酶活性和廣泛的底物特異性，能優(yōu)先分解與疏水性氨基酸、含硫氨基酸、芳香族氨基酸C末端鄰接的酯鍵和肽鍵。在pH4.0到pH12.0均有 活性，最適pH在7.5-8.0之間，最適溫度在50-55℃之間。在0.2-1%SDS或者10mM尿素存在 下，蛋白酶K顯示出更高的活力，而在常用濃度的EDTA，Triton X-100，鹽酸胍存在下均對(duì)蛋白酶K活力影響不大。

隨著人類對(duì)疾病的認(rèn)識(shí)逐步深入到基因?qū)用妫约盎驒z測(cè)技術(shù)的進(jìn)步，通過(guò)對(duì)各種DNA和/或RNA樣本的病原性突變的檢測(cè)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)疾病的檢測(cè)和診斷。蛋白酶K主要在DNA、RNA 提取 過(guò)程中抑制核酸酶和原位雜交中起著重要的作用。另外，蛋白酶K可替代 DEPC 處理 RNA 抽提用的離心管和槍頭,實(shí)現(xiàn)滅活 RNase A 的目的,也用于處理 RNase-Free的水，為脈沖電場(chǎng)凝膠電泳、RT-PCR等準(zhǔn)備無(wú)DNase、RNase的樣品，提取組織中非蛋白成份時(shí)降解含有蛋白質(zhì)的雜質(zhì)用途（例如DNA疫苗和肝素的制備）等。

SUMO 蛋白酶（也稱為 ULp）是釀酒酵母中 ULP1（UbL 特異性蛋白酶 1）的重組片段。其對(duì) SUMO 蛋白融合具有高度特異性，識(shí)別 SUMO 的三級(jí)結(jié)構(gòu)而不是氨基酸序列。SUMO 蛋白酶特點(diǎn)：

重組TEV蛋白酶是經(jīng)過(guò)基因工程改造后表達(dá)和純化后獲得的，TEV蛋白酶特異性的識(shí)別Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gly/Ser組成的七個(gè)氨基酸序列,并在 Gln 和 Gly/Ser 之間切割。與EK、SUMO 等蛋白酶相比，具有高活性和高特異性的特點(diǎn)，TEV蛋白酶經(jīng) 6×His 標(biāo)簽純化獲得(含組胺酸標(biāo)簽)，其純度高達(dá)99％；該酶剪切反應(yīng)完成后，可通過(guò)His標(biāo)簽純化樹(shù)脂Ni-NTA Resin去除，從而達(dá)到純化目的蛋白的目的。在4-30℃、pH 6.0-8.5反應(yīng)條件下均具有活性，相對(duì)反應(yīng)條件比較寬松,主要用于融合蛋白標(biāo)簽去除。本蛋白來(lái)源為大腸桿菌重組表達(dá)。

HRV 3C蛋白酶是一種用來(lái)切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶。識(shí)別Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓-Gly-Pro的切割位點(diǎn)的半胱氨酸蛋白酶，具有組氨酸標(biāo)簽，易于通過(guò)Ni-NTA樹(shù)脂去除。

用來(lái)切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶，識(shí)別五個(gè)氨基酸序列DDDDK↓的蛋白酶，酶切后不殘留多余的氨基酸。

Caspase-2是特異性切割酶，參與負(fù)責(zé)凋亡執(zhí)行的半胱天冬酶的激活級(jí)聯(lián)?？赡芡ㄟ^(guò)激活細(xì)胞死亡所需的蛋白質(zhì)或使細(xì)胞存活所需的蛋白質(zhì)失活來(lái)發(fā)揮作用。切割位點(diǎn)是目標(biāo)蛋白(POI)的N端殘基;可以在15min內(nèi)完成85-90%的切割。